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tianming887金虫 (正式写手)
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[交流]
请教色谱条件
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小弟最近在分离一种化合物，非常头疼，该化合物的色谱条件极其诡异。 首先，一开始，必须使用一个洗脱强度极小的溶剂比例进行洗脱，我用95%的水（流动相甲醇和水）。如果溶剂比例加大的话，会有一部分我要的东西随溶剂洗脱下来，另一部分留在柱子上，要使用很高的醇比例进行洗脱才能出峰。 但是在随后的洗脱中，我逐步提高醇的比例，到40min的时候，已经是100%甲醇了，依然我要的东西不出峰。 这样连续进几针，主峰都不出，在下一针的时候，一开始用大比例的醇洗脱（50%甲醇），会在溶剂出峰位置将前几次留在柱子上的我要的东西一起带下来，出个很大的峰。 我要的东西是水溶性的，带一个正电荷，在酸性条件下比较稳定，但在以前的实验中发现，如果往流动相中加酸的话峰会拖尾，非常严重，所以我的流动相没有加酸。 各种现象都很令我头大，请高人不吝指教，谢谢。 |
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3楼2009-05-19 12:52:06
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