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木虫阿哲

新虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE电泳胶不凝是怎么回事 已有4人参与

我们做这个实验有几次了,最近一个月前几次还凝得不错,这几次次次不凝,APS是现用现配,没有超过一周,TEMED也一直4℃保存,凝胶过程也没有去摇晃,不知道问题出在哪里,求大佬指教

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hytdzh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
木虫阿哲(渊博震天代发): 金币+2, 鼓励积极回帖 2019-04-27 18:06:33
考虑;1. 丙烯酰胺, 缓冲体系的PH是是否有问题?
2. APS浓度,我们实验室一般10mg/ml
永不放弃
10楼2019-04-27 17:37:41
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普通回帖

123456zmj

木虫 (著名写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-22 22:35:34
去其他实验室借AP和TEMED试试。

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2楼2019-04-22 10:41:42
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祎祎祎祎祎超

新虫 (职业作家)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-22 22:35:45
可能和温度有关

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我和谁都不争,和谁争我都不屑
3楼2019-04-22 10:49:45
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木虫阿哲

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 123456zmj at 2019-04-22 10:41:42
去其他实验室借AP和TEMED试试。

好的,谢谢你

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4楼2019-04-22 11:31:15
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木虫阿哲

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 木虫阿哲 at 2019-04-22 11:31:15
好的,谢谢你
...

好的,谢谢你

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5楼2019-04-22 11:31:23
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药大C斌

新虫 (正式写手)

1.temed加的量太少2.时间不够3.温度太低.

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6楼2019-04-22 12:29:43
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macgray1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是temed加的量不够,我有一次加的量很少就导致胶凝固的太慢了,后来多加了一倍就正常了
7楼2019-04-22 16:18:08
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木虫阿哲

新虫 (小有名气)

首先谢谢大家的解答,我们把装置放在冰箱冷藏了,也在室温下进行了,都没凝,应该不是温度的问题;之前因为不凝已经加大TEMED的量了,现在是《分子克隆》上配方的十倍量还是不凝;TEMED是新买的,APS是现配的,这两个药品应该是没有问题的;我们每次都是在半个小时或一个小时的时候观察,这期间不会晃动装置查看,所以也不是时间短的问题。真的想不通为什么,脑瓜疼。

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8楼2019-04-23 10:02:09
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junjieshao

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

9楼2019-04-27 01:01:19
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