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就现在手给我

新虫 (小有名气)

[求助] 提出的mRNA存在有机溶剂污染还能正常PCR吗 已有1人参与

今天提了mRNA,测出结果A260/280=2.0,但是A260/230只有0.68。有机溶剂污染严重。问这样的mRNA还能进行后续的PCR或者qPCR吗,对结果有影响吗?  
还有为什么每次同一批提的mRNA总有一个存在有机溶剂污染呢?其他几个结果都很好。

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溜溜小鱼xhm

新虫 (小有名气)

可以做pcr,可能是你的溶剂没有挥发干。

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我相信梦里能到达的地方,总有一天脚步也能到达
2楼2020-04-25 17:29:50
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ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

抽rna,卫生条件要求比较高,每一步严格执行,你这个是我见过的比较差的结果了,如果不是protocol有问题,就是操作有重大问题,不然不会这么差,也就用了trizol,氯仿,异丙醇这些,你是不是分相后吸取水相的时候把有机相也吸了?
Behind the glory is a loneliness
3楼2020-04-30 15:12:50
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ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

补充一下,最好别做接下来的反转录和Qpcr,你都不确定RNA的质量,做下去意义不大,让老板知道了,被怼死 啊

即使做出了,重复性如何保证?你敢相信结果吗?
Behind the glory is a loneliness
4楼2020-04-30 15:14:47
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