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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 提出的mRNA存在有机溶剂污染还能正常PCR吗
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就现在手给我

新虫 (小有名气)

[求助] 提出的mRNA存在有机溶剂污染还能正常PCR吗 已有1人参与

今天提了mRNA，测出结果A260/280=2.0，但是A260/230只有0.68。有机溶剂污染严重。问这样的mRNA还能进行后续的PCR或者qPCR吗，对结果有影响吗？  
还有为什么每次同一批提的mRNA总有一个存在有机溶剂污染呢？其他几个结果都很好。

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1楼 2019-04-21 22:58:01
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溜溜小鱼xhm

新虫 (小有名气)
可以做pcr，可能是你的溶剂没有挥发干。

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我相信梦里能到达的地方，总有一天脚步也能到达
2楼2020-04-25 17:29:50
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ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

抽rna，卫生条件要求比较高，每一步严格执行，你这个是我见过的比较差的结果了，如果不是protocol有问题，就是操作有重大问题，不然不会这么差，也就用了trizol，氯仿，异丙醇这些，你是不是分相后吸取水相的时候把有机相也吸了？
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Behind the glory is a loneliness
3楼2020-04-30 15:12:50
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ECUST_CAPF

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

补充一下，最好别做接下来的反转录和Qpcr，你都不确定RNA的质量，做下去意义不大，让老板知道了，被怼死 啊

即使做出了，重复性如何保证？你敢相信结果吗？
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Behind the glory is a loneliness
4楼2020-04-30 15:14:47
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