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susizheng木虫 (著名写手)
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求助：关于蛋白质电泳结果的奇怪现象
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最近在做一个蛋白的表达，分子量为80多KDa。跑胶所用胶浓度为12%， 与对照相比，发现诱导后的样在80多KDa的地方跑出一条较粗的月亮状条带，凹口朝上，而其下有一段区域没有条带。也就是说中间出现了一段空白。 不知道各位虫友在试验中是否出现了这种情况，特别是表达分子量较大蛋白的时候。 我估计大致原因是我的目的蛋白表达量较大，分子量较大，将一些蛋白阻拦在80KDa的地方，所以我重新做10%的胶，重新点样，另外将样稀释一倍后也点了几个样，发现没稀释的样现象没变化，稀释的样，多跑出了3条带，但中间依然有一段空白。现在我该怎么办，不会继续稀释我的样吧，而且我的样其他条带在浓度上大致和对照差不多。  说了那么多不知道表达清楚没有。望各位达人多多指教。 |
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2楼2009-05-18 12:27:44
3楼2009-05-18 13:14:33
susizheng
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10楼2009-05-18 19:37:06