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[求助]
做定点突变时连个基因片段融合不了！！！已有1人参与
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各位大神： 你们好，我最近在做定点突变，突变位点在基因的中部，做pcr时先p出前部分基因片段和后部分片段，然后利用PCR将前部分和后部分基因片段做模板，加入上下游物做融合PCR,融合时依据引物Tm值将退火温度设置为71.5度，但总失败，求原因！求指导！！！！ |
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