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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 载体GFP标签如何去除
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饿的神啊

新虫 (著名写手)

[求助] 载体GFP标签如何去除 已有1人参与

之前看定位，用了GFP标签载体，后面发现这个标签和后面用到的荧光染料有冲突，想把这个标签去掉，该如何去除？
我查了酶切位点，上游是KpnI下游是Eco53KI，如果用这两个酶双酶切，我需要补齐被切掉的酶切位点片段吗？
之前插入的片段在GFP前面，去掉了终止密码子，可以和GFP融合表达，如果去掉了GFP，我需要补回终止密码子吗？

@wizardfan @biostar2009 @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2019-04-09 15:06:17
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饿的神啊

新虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 厚德求是 at 2019-04-10 13:41:43
宿主是什么，质粒诱导表达？

柑橘原生质体，之前用GFP是看定位，现在想用H2DCFDA探针看活性氧积累，所以要去掉GFP

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5楼2019-04-10 19:22:20
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王查查23

禁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-10 20:53:34
本帖内容被屏蔽
2楼2019-04-10 00:06:43
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厚德求是

木虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-04-10 20:53:47
直接pcr在linker之前做定点突变，做一个终止子。

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3楼2019-04-10 13:41:05
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厚德求是

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
饿的神啊: 金币+50, ★有帮助 2019-04-12 16:01:05
宿主是什么，质粒诱导表达？

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4楼2019-04-10 13:41:43
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