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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

[交流] 求助:请问如何进一步提高蛋白的溶解度

我要表达的蛋白溶解度很低,换了好几个载体,都形成了包涵体,现在换用了PGEX-4T-1载体,蛋白微溶,请问如何进一步提高蛋白的溶解度?我的蛋白表达条件:12度,IPTG浓度0.1mM,诱导24小时,LB培养基
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Thank-you,so-blue.
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

引用回帖:
Originally posted by anquren at 2009-5-16 08:35:
实在不行,只有改成突变体了

我要的是完完全全野生型的蛋白质
Thank-you,so-blue.
5楼2009-05-16 14:51:34
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anquren

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
susizheng(金币+1,VIP+0):谢谢 5-16 13:33
susizheng(金币+1,VIP+0): 5-16 14:50
susizheng(金币+1,VIP+0): 5-16 14:51
实在不行,只有改成突变体了
2楼2009-05-16 08:35:34
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mimisikai

金虫 (小有名气)

★ ★
susizheng(金币+2,VIP+0):谢谢 5-16 13:34
1 试试融合表达
2 温度12度似乎不好,对菌很不利
3 若条件允许删去蛋白中一些不要的疏水蛋白,溶解性这么差很可能是膜蛋白吧,可以考虑把跨膜区删了
4楼2009-05-16 10:14:18
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

引用回帖:
Originally posted by mimisikai at 2009-5-16 10:14:
1 试试融合表达
2 温度12度似乎不好,对菌很不利
3 若条件允许删去蛋白中一些不要的疏水蛋白,溶解性这么差很可能是膜蛋白吧,可以考虑把跨膜区删了

2.考虑12度是因为温度低,蛋白合成慢,对包涵体的形成不利。
3.我的蛋白也不是膜蛋白
Thank-you,so-blue.
6楼2009-05-16 14:55:46
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