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czbd2016

铜虫 (小有名气)


[交流] 小鼠粪便DNA提取

最近对小鼠粪便中DNA进行提取,已经完成,而且纯度较好,对其进行普通pcr,却什么结果页没有,已用标准菌确定引物和其他试剂没有问题,问题是处在模板上了吗?为什么p不出来?
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cizhenhua

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小鼠因为它吃的东西不一样,粪便DNA提取有很大差异性,应该还是提取的DNA里面有抑制PCR的杂质。可以尝试用GTC溶液多漂洗一次,或者使用带有预洗溶液可以去除腐殖酸等的试剂盒。
8楼2020-03-19 10:16:44
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)


可能是提取到的DNA量不够,我们用BIODAI离心法提取单次可以处理1000ul的样本量,提取到的DNA可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等下游实验
2楼2019-04-04 17:09:54
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cizhenhua

木虫 (正式写手)



czbd2016(金币+1): 谢谢参与
虽然提取的纯度比较好,但是应该还是存在抑制PCR的杂质,可以尝试用GTC溶液多漂洗一次,或者使用有预洗步骤去除腐殖酸等的试剂盒。希望对你有帮助。
7楼2020-03-19 10:14:13
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