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PANREY

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物连接T载体 已有4人参与

PCR产物连接t载体,要确定PCR产物是否是单一条带,下一步该怎么做? 不太懂

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xiaodengxin

金虫 (正式写手)

4楼2019-06-06 02:39:50
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yuying0421

新虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
跑胶,把大小正确的条带切胶回收,测序。

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2楼2019-06-01 21:06:14
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三只0小猪仔

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我PCR产物连接T载体,做蓝白斑筛选,都是白斑,挑但菌落,做菌落pcr,没有目的条带,难道都是假阳性吗?我菌落pcr引物跟目的基因一样 求指教

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3楼2019-06-02 15:24:38
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glowinthesky

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 三只0小猪仔 at 2019-06-02 15:24:38
我PCR产物连接T载体,做蓝白斑筛选,都是白斑,挑但菌落,做菌落pcr,没有目的条带,难道都是假阳性吗?我菌落pcr引物跟目的基因一样 求指教

蓝白斑不准。你用载体上的引物试试,记得加空载体阴性对照,都跑不出来是你PCR出问题,都是空载说明你没连上。
5楼2020-10-14 17:00:05
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