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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 流式细胞仪对微藻和细菌分别计数求教
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礼部尚书

新虫 (正式写手)

[求助] 流式细胞仪对微藻和细菌分别计数求教 已有1人参与

我在进行细菌和微藻的混合培养，看到文献中都是用流式细胞仪进行计数，他们做的是酵母和微藻，利用微藻叶绿素自荧光区分二者。
我的这个菌也有叶绿素，而且我要做异养培养，后面不能合成叶绿素。
请问我应该怎么设置参数去计数呢？
两者有显著大小区别，荧光染色之后，使用SSC对FSC作图。
可是我没用过流式细胞仪，咨询负责仪器的老师他说他也不知道计数是怎么操作的
求大神可以指教一下哈！

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1楼 2019-03-28 16:28:29
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quiller2000

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
snoopytbw: 金币+3, 鼓励 2019-03-30 11:59:21
要么用大小区分，要么选各个荧光通道。先用纯菌，包括自养前后的，找出来差异。有色素等话，都会有很多荧光。总之要找出来差异。后期分选也要要啊……计数，分选，单细胞组，整数据，写文章

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致良知
2楼2019-03-28 18:25:32
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quiller2000

木虫 (著名写手)
分析分选，欢迎讨论。

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致良知
3楼2019-03-28 18:26:09
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yuyuwuxin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
礼部尚书: 金币+10 2019-03-29 12:55:57
引用回帖:
3楼: Originally posted by quiller2000 at 2019-03-28 18:26:09
分析分选，欢迎讨论。

是不是可以TOP3染色，FL-1和FL-4图，按照红荧光和绿荧光进行区分，最好还是按照大小进行区分但是找到合适的阈值有点难~~欢迎指导
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4楼2019-03-29 10:23:10
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礼部尚书

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuyuwuxin at 2019-03-29 10:23:10
是不是可以TOP3染色，FL-1和FL-4图，按照红荧光和绿荧光进行区分，最好还是按照大小进行区分但是找到合适的阈值有点难~~欢迎指导...

按照大小区分的话 怎么设置参数呢 我的藻菌大小有显著区别

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5楼2019-03-29 12:55:14
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yuyuwuxin

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 礼部尚书 at 2019-03-29 12:55:14
按照大小区分的话 怎么设置参数呢 我的藻菌大小有显著区别
...

建议以小的设置阈值
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6楼2019-03-29 13:08:26
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quiller2000

木虫 (著名写手)
不是的，你看看你fcm有多少通道，找出特异性再说

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致良知
7楼2019-03-29 13:31:09
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quiller2000

木虫 (著名写手)
细菌很多时候用前向不行，无法和培养基中的噪音区分开，什么都看不到

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致良知
8楼2019-03-29 13:32:01
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礼部尚书

新虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yuyuwuxin at 2019-03-29 13:08:26
建议以小的设置阈值...

这样怎么分开计数呢？

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9楼2019-03-29 15:23:26
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礼部尚书

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by quiller2000 at 2019-03-29 13:32:01
细菌很多时候用前向不行，无法和培养基中的噪音区分开，什么都看不到

本人是流式细胞仪小白 可否详细指导一下操作呀

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10楼2019-03-29 15:24:29
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