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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 大肠杆菌外源蛋白不表达
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wuliang23

金虫 (小有名气)

[交流] 大肠杆菌外源蛋白不表达 已有4人参与

将目的基因导入bl21，发现目的蛋白未表达，或者是表达量很低。用的16摄氏度 0.4mMIPTG诱导。之前也试过不同浓度梯度0.1-0.4mMIPTG结果一样，sds无明显目的条带，wb无目的条带。测序表明启动子和序列都对，为什么还是有这种现象，求大神解答，郁闷死了

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1楼 2019-03-26 22:07:51
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prettydog

铁杆木虫 (著名写手)
换个表达菌株

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2楼2019-03-27 09:13:46
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不吃肉肉的鱼

新虫 (小有名气)
包含体

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3楼2019-03-27 11:12:03
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wuliang23

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by prettydog at 2019-03-27 09:13:46
换个表达菌株

好的，我在试，看看结果如何吧

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4楼2019-03-27 16:10:16
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wuliang23

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 不吃肉肉的鱼 at 2019-03-27 11:12:03
包含体

不是包涵体，上清沉淀都没有

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5楼2019-03-27 16:10:47
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xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小冀-: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-04-01 17:26:15
建议换质粒，用不同的启动子+RBS来试你这个基因。可能是翻译的时候遇到问题。
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6楼2019-04-01 16:55:21
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四边前天

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
7楼2019-04-02 12:48:03
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