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sgba0307

铁虫 (小有名气)

[交流] 提取质粒的问题

我将质粒转入到DH5a中之后涂平板培养了15小时左右,平板上的菌落密密麻麻,但是都很小,挑平板上的单菌落培养后用质粒提取试剂盒提取质粒,将所提取的质粒点样2uL电泳后,只有一条很亮的带,请问:
(1)平板上菌落很小的原因?
(2)质粒电泳只有一条带是怎么回事?
谢谢各位兄弟姐妹帮忙解答!
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joamitith

铜虫 (小有名气)

1)转化的质粒过多,导致生长的转化子相互竞争培养基,营养贫瘠不会长得很快。
2)质粒提取试剂盒的柱子优先吸附超螺旋结构的质粒DNA
心随云飘,足沿山登。
3楼2009-05-14 20:55:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

很小才正常
因为密,所以小
如果你发现很大……恭喜你,里面含有杂菌或者空质粒的几率很大

质粒提取试剂盒会洗掉一些其他构象的质粒,无所谓,可以用
2楼2009-05-14 17:14:17
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