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ywwabc

新虫 (小有名气)

[求助] 配体受体结合elisa验证实验已有1人参与

求助:关于配体受体结合elisa验证实验,有2个蛋白,受体:A蛋白-FC标签,配体:B蛋白-his标签,
         
          A包板,B蛋白孵育,his标签抗体和B多抗检测都有结合曲线,也都可以计算出EC50,

           但是B蛋白包板,A蛋白孵育,FC标签抗体和A多抗检测都无结合,整个实验组的OD值与阴性对照差不多,可以理解为无结合能力。

          实验设置有空白对照、阳性对照(孵育蛋白+检测抗体)、阴性对照(包被蛋白+检测抗体),OD值都是正常的。

         请问各位大神有没有遇到过类似情况,或者知道这种情况的原因,,望解惑。
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ywwabc(kk1424代发): 金币+10 2020-04-26 11:03:27
1,B蛋白包板效率,可能不太好包板,与A形成复合物后增加重量,同样洗板强度将这个复合物洗下来2,FC抗体和A多抗同时失效,可能行不大3,操作问题,重复一遍
2楼2019-04-03 17:11:21
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