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sjtuhx

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 色谱柱强保留的化合物怎么洗脱

目前拟建立一HPLC方法测定一长链脂肪酰氨基酸类化合物,该化合物含18碳硬脂酸结构,在甲醇中溶解,其他溶剂中溶解差
使用C18,C8,-CN基柱,纯甲醇冲洗均未能将该化合物从柱上洗脱
也试用过磷酸盐缓冲溶液冲洗,同样效果不佳

请问还有什么方法能将其洗脱(不用正相)
多谢!!
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sjtuhx

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jsys at 2009-5-13 22:29:
换成C8柱子,并且使你的柱子尽可能的短。这样的柱子保留要低的多,把你的流动相加入一定量THF进行高有机相洗脱。
如果想要洗脱,换成5CM的短柱子用上面的流动相是肯定能洗脱的。
关键问题是我想说的,你的样品能 ...

多谢版主指教
我再试试你说的方法

用的是VWD 270nm
除去色谱柱直接进样检测有强的色谱峰,所以推测是在色谱柱上保留了

[ Last edited by sjtuhx on 2009-5-14 at 12:32 ]
3楼2009-05-14 12:30:08
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查看全部 3 个回答

jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab

★ ★ ★
opq691(金币+3):辛苦啦,很详细
换成C8柱子,并且使你的柱子尽可能的短。这样的柱子保留要低的多,把你的流动相加入一定量THF进行高有机相洗脱。
如果想要洗脱,换成5CM的短柱子用上面的流动相是肯定能洗脱的。
关键问题是我想说的,你的样品能出峰吗?响应值大吗?用的是什么检测器呀?有相关的标准或文献吗?这些是很重要的。如果有据可查的话,那就用我上面说的方法试试,应该可以的。
2楼2009-05-13 22:29:17
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