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书画江湖

新虫 (小有名气)

[交流] western-blot注意事项 已有2人参与

滤纸、胶、膜之间的大小,一般是滤纸>=膜>=胶。

·滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡,气泡会造成短路。

·因为DEPF膜的疏水性,膜必须首先在甲醇中完全浸湿。而且在以后的操作中,膜也必须随时保持湿润(干膜法除外)。

·滤纸可以重复利用,上层滤纸(靠膜)内吸附有很多转移透过的蛋白质,所以上下滤纸一定不能弄混,在不能分辨的情况下,可以将靠胶滤纸换新的。

·转移时间一般为1.5 小时,( 1mA-2mA/cm2,10% gel),可根据分子量大小调整转移时间和电流大小。

·灌胶时尽量均匀,否则可能会出现气泡。

·为避免出现信号低的情况,最好选用高灵敏度的发光液,如enlight发光液等。
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最棒vita

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by 噜噜要回南方 at 2019-10-08 18:48:39
蛋白质在滤纸里不会降解掉吗

一直没分过滤纸是哪边的,滤纸都是晾干了再用的,这样做有影响吗?

发自小木虫Android客户端
3楼2021-03-18 21:14:55
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噜噜要回南方

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蛋白质在滤纸里不会降解掉吗

发自小木虫Android客户端
2楼2019-10-08 18:48:39
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