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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 酵母菌能超声破碎吗？功率和时间怎么设定。
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厚德求是

木虫 (著名写手)

[求助] 酵母菌能超声破碎吗？功率和时间怎么设定。 已有1人参与

如题，我需要向各位求助酵母菌的超声破碎实验方法。实验的目的是提取酵母体内异源表达的蛋白质。

我之所以考虑使用超声破碎是因为样品数量的较多，而且每个样品的菌量不大，用匀浆机不现实。我的宿主是 Pichia pastoris，希望能得到大家的帮助。

谢谢。
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1楼 2019-03-20 02:56:57
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
用溶壁酶处理后，再超声或者液氮冻融后，研磨，效果很好的

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

厚德求是
2楼2019-03-20 08:49:38
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厚德求是

木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-03-19 12:49:38
用溶壁酶处理后，再超声或者液氮冻融后，研磨，效果很好的

谢谢您。您是提供两种方法：第一，酶溶解之后用超声破碎，取上清；第二，液氮冷冻之后研磨，随后溶解取上清液。我不想用酶溶解，因为我的目标蛋白比较脆弱，是膜蛋白。那么我就试试液氮研磨吧。还想追问一下，研磨后的溶解液有什么需要注意地方，有特别需要添加的成分吗？
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3楼2019-03-20 09:01:18
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panbenxun

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
厚德求是: 金币+2, ★有帮助, 谢谢，样品量大，问题要求高通量，所以用这个方法不现实。 2019-03-25 10:20:10
我们也是做的膜蛋白，用的高压破碎效果比较好。
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4楼2019-03-22 18:32:58
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青柠檬PCR

新虫 (正式写手)
可以用反复冻融

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5楼2019-06-05 15:46:20
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DNA有故事

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2019-06-15 16:00:19
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