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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] λ-red重组体系 插入片段大小 已有1人参与

各位前辈,我想要向MG1655里插入一段片段,这个片段好长,有4000多,请问用pKD46质粒的话,能插进去吗?谢谢!!
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)

应该是可以的,如果不得行,可以选择分步插入

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2楼2019-03-20 15:41:23
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rainontime

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张凡云 at 2019-03-20 15:41:23
应该是可以的,如果不得行,可以选择分步插入

谢谢!!可以再请教一下,一般怎么选择MG1655的插入位置呢?我了解到应该是找一个不是特别重要的基因,用待插入的片段代替之。那怎么找MG1655的这种基因呢?谢谢!
3楼2019-03-21 16:04:45
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)

你选择一个目前研究过,对其正常生理代谢无影响的非必须基因就可以啦

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4楼2019-03-21 16:08:45
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rainontime

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 张凡云 at 2019-03-21 16:08:45
你选择一个目前研究过,对其正常生理代谢无影响的非必须基因就可以啦

好的好的,谢谢!请问有介绍怎么设计同源臂,FRT位点的资料吗?不过为啥我想给您评分送金币,显示您不是应助贴啊?
5楼2019-03-21 16:19:16
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
6楼2019-05-08 15:52:39
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lucklizhen

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果片段上有抗性的话,很容易插入片段
7楼2019-05-31 22:00:16
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