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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » λ-red重组体系 插入片段大小
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rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] λ-red重组体系 插入片段大小 已有1人参与

各位前辈，我想要向MG1655里插入一段片段，这个片段好长，有4000多，请问用pKD46质粒的话，能插进去吗？谢谢！！
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1楼 2019-03-19 15:41:45
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)
应该是可以的，如果不得行，可以选择分步插入

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2楼2019-03-20 15:41:23
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rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张凡云 at 2019-03-20 15:41:23
应该是可以的，如果不得行，可以选择分步插入

谢谢！！可以再请教一下，一般怎么选择MG1655的插入位置呢？我了解到应该是找一个不是特别重要的基因，用待插入的片段代替之。那怎么找MG1655的这种基因呢？谢谢！
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3楼2019-03-21 16:04:45
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张凡云

至尊木虫 (职业作家)
你选择一个目前研究过，对其正常生理代谢无影响的非必须基因就可以啦

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4楼2019-03-21 16:08:45
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rainontime

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 张凡云 at 2019-03-21 16:08:45
你选择一个目前研究过，对其正常生理代谢无影响的非必须基因就可以啦

好的好的，谢谢！请问有介绍怎么设计同源臂，FRT位点的资料吗？不过为啥我想给您评分送金币，显示您不是应助贴啊？
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5楼2019-03-21 16:19:16
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匿名

用户注销 (正式写手)
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6楼2019-05-08 15:52:39
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lucklizhen

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果片段上有抗性的话，很容易插入片段
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7楼2019-05-31 22:00:16
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