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guyue2885

银虫 (正式写手)

[交流] 高效液相色谱梯度洗脱问题

高效液相色谱梯度洗脱时基线是不是就是不平的啊?我的跑出来是不平的,是哪方面原因啊?在出峰时峰型是锯齿状,怎么回事啊
PS:我用的流动相是甲醇和磷酸水(pH3.2)

[ Last edited by guyue2885 on 2009-5-13 at 21:05 ]
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yunxia1549

新虫 (初入文坛)


chiraler(金币+1,VIP+0):辛苦! 5-13 16:44
1.吸收波长多少?是不是末端吸收造成的
2.梯度设置的是不是太多大了,这和仪器有很大关系,有些液相走梯度的效果很差的
3.看是不是柱子的问题,再不用酸的情况下进一针其他样品看看效果如何
2楼2009-05-13 16:22:23
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zt19820823

金虫 (小有名气)


opq691(金币+1):感谢应助,欢迎常来分析版
好像那天听安捷伦的工程师说 泵的好坏会影响基线的平稳性阿
3楼2009-05-13 17:42:21
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20goodluck20

金虫 (正式写手)


opq691(金币+1):感谢应助,欢迎常来分析版
在其它条件不变时,换根柱子试试,先排除柱子的干扰,再考察流动相是否过滤,在线脱气是否好使,看看梯度设的是否变化太大,看看滤头是否干净
4楼2009-05-14 09:45:22
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wangwei7688

金虫 (小有名气)


jsys(金币+1,VIP+0):感谢参与! 5-14 16:34
用纯甲醇冲上一段时间,基线会平的。实在不行就用梯度洗脱
5楼2009-05-14 15:09:29
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兜兜1280

铜虫 (小有名气)

★ ★
jsys(金币+2,VIP+0):感谢参与 5-14 16:34
1.流动相中含有磷酸时,需要先用低浓度的甲醇冲洗,然后,慢慢加大甲醇的比例。
2.基线不问,有可能是泵的压力不稳所致,查试一下泵头是否干净,要定期清洗;保护柱如果不干净也会导致柱压不稳,基线不平;室内的温度过高也会导致基线不稳。
6楼2009-05-14 15:21:14
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lilei1220

金虫 (正式写手)

谢谢

谢谢大家!
7楼2009-05-15 19:51:21
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