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A549慢病毒转染后对照细胞出现异常
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你是路人甲
铜虫
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虫号: 13104654
[交流]
A549慢病毒转染后对照细胞出现异常
最近用慢病毒携带目的基因转染肺腺癌A549细胞,慢病毒转染GFP空白质粒组作为阴性对照,但克隆形成、划痕及transwell都显示慢病毒转染GFP空白质粒组(对照组)较未转染病毒组细胞(A549组)侵袭、增殖的快,请问这是什么原因?
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1楼
2019-03-15 08:59:33
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宇宙小妖怪
铁虫
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帖子: 215
在线: 43.4小时
虫号: 13010065
慢病毒是携带外源基因进入细胞了,难免对细胞本身产生影响。另一方面,不知道慢病毒整合到细胞基因组的哪里,可能就恰好整合到促进生长的那一段基因前面了。建议降低感染细胞使用的病毒数,选择合适的MOI,最好能做个梯度试试。用病毒的话也有些缺点,最明显的就是价格比较贵,10*8级滴度的病毒,找公司包装的话,一般要10000元以上,我们实验室经费有限,虽然做过A549的转染,是用RFect siRNA转染方法做的,对细胞的伤害相对小好多
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3楼
2019-03-15 16:51:43
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diaoqinzho
银虫
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帖子: 662
在线: 75.4小时
虫号: 13188469
★
你是路人甲(金币+1): 谢谢参与
外源性基因本身对细胞就有影响,实验前要先摸下慢病毒的浓度,寻找一个对细胞生长影响不大,感染效率又符合实验要求的浓度
发自小木虫IOS客户端
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6楼
2019-06-24 13:52:47
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miaojiabing
2楼
2019-03-15 12:29
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你是路人甲(金币+1): 谢谢参与
youngen
4楼
2019-03-16 07:57
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你是路人甲(金币+1): 谢谢参与
youngen
5楼
2019-03-16 07:58
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