| 查看: 1213 | 回复: 0 | ||
[求助]
pesc-his和pesc-leu质粒在酿酒酵母中的丢失问题
|
| 我们在酿酒酵母中做crispr/cas9基因敲入，在p-416质粒上表达cas9(低拷贝，URA筛选标记)，在pesc-his表达了gRNA，成功之后想要把这两个质粒去掉，就在YPD培养过夜，涂布在FOA平板上，p-416的质粒很容易丢失，但是pesc-his的质粒有时很难去除掉，反复在YPD的培养基中培养也不行，按说这种游离的质粒在天然培养基中很容易丢失才对。为了进一步促使pesc-his的丢失，我在该质粒上表达了URA，并验证可以表达，但是在FOA板上长出的菌株中仍然有携带pesc-his质粒的，把pesc-his换成pesc-leu也会出现这种情况，我就很疑惑，请问各位大佬，这是怎么回事呢？谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
博士延得我，科研能力直往上蹿
已经有7人回复
-
退学或坚持读
已经有27人回复
-
面上基金申报没有其他的参与者成吗
已经有5人回复
-
有70后还继续奋斗在职场上的吗？
已经有5人回复
-
遇见不省心的家人很难过
已经有22人回复
-
多组分精馏求助
已经有6人回复
