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黄金伏地魔

新虫 (小有名气)

[求助] 基因敲除的方法及其区别 已有1人参与

大家好,我是刚进行自己的实验,遇到了问题想要向各位请请教。目前有关于基因敲除的方法我了解到的主要有:(1)利用cre/loxp位点进行同源交换;(2)CRISPR/Case9  (3)定点突变。然而我试验中需要敲除基因的C末端(仅有4-5个氨基酸残基),我们实验室和知网的硕博士论文中普遍用的是同源重组法进行敲除,我想知道的是我的情况能用定点突变法进行敲除吗,有没有相关案例或者相关论文?另外有关于基因敲除的其他方法具体介绍及其区别求告知,感谢诸位。
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我太秀了

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

定点突变敲除是指的用crispr加oligo做敲除吗?如果是这种的话,是可以实验的,设计CRISPR质粒,然后再合成删除后的序列的oligo,共转染到细胞内,进行单克隆筛选即可
专注细胞和微生物基因编辑知识分享
2楼2020-05-09 13:27:34
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