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黄金伏地魔

新虫 (小有名气)

[求助] DHE红色荧光探针测定酵母细胞内ROS水平

关于用DHE红色荧光探针测定ROS水平,我用的菌种是酿酒酵母(含有pYES2质粒),我实验步骤是这样的:

1.将菌株接到50ml SC-ura培养基中培养36h

2.分装至两个小玻璃瓶中各10ml(加或者不加1mmol过氧化氢),培养1h

3.用PBS漂洗2次,再加入100微升PBS,加入探针1微升,混匀,37°   30min,避光

4.用PBS漂洗2次,加入100微升PBS

5.去20微升于载玻片上,盖上盖玻片,用荧光显微镜观察


结果是用绿光激发后没有红色荧光出现,请问一下我可能是那个步骤出问题了?还有就是有没有人做成功的求分享!
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Pointyf

新虫 (初入文坛)

2楼2024-11-20 21:23:42
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