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sweetzym

铜虫 (小有名气)

[交流] 新手请教关于化学发光的问题

我在做鲁米诺化学发光的检测中数据重复性不好,信噪比很低,本底很高,而且平行的数据差异比较大,所以测出来的数据基本上是没有用的,请教下各位有没有遇到这种情况的,能否提点意见或者建议,谢谢了。
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cindyk

金虫 (小有名气)

★ ★
opq691(金币+2):感谢应助,欢迎常来分析版
楼主能否把实验目的,和操作过程描述的更详细一些,一般说来,化学发光是伴随化学反应的,和动力学过程有关,所以定量重现性不如测量光电信号的仪器方法.
最简便的改进是利用流动注射来控制反应试剂的混合.减少手工操作的人为误差.
3楼2009-05-13 19:04:48
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chenran8196

铜虫 (小有名气)

★ ★
opq691(金币+2):感谢应助,欢迎常来分析版
平行的数据差异比较大可能是仪器本身的问题,鲁米诺在低浓度不稳定,双氧水本身也不大稳定,另外鲁米诺本身发光灵敏度很高,所以必须保证溶液不受外界干扰,解决的办法是每次换液前用二次水冲洗外壁
2楼2009-05-13 10:08:15
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sweetzym

铜虫 (小有名气)

我做的是luminol+双氧水+金属配合物的催化剂,目的是看催化剂的效果,测的是动力学检测,用beckman的多用分析仪检测,96孔板,用枪加样,有时候会用排枪,会有人为操作的误差和时间的误差,但是不至于造成那么大的差异
4楼2009-05-15 10:20:40
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cindyk

金虫 (小有名气)

★ ★
jsys(金币+2,VIP+0):感谢参与应助!常来分析版呀! 5-15 18:57
楼主说本底很高,可能是因为你把luminol+H2O2作为本底了;PH值也很重要,碱性下,luminol也有很强背景。
你试试把luminol+配合物作为本底,缓冲控制中性条件下,应该没有强的发光信号本底,用枪加H2O2,再测。
有的催化剂很强,弱碱性条件下,溶解氧经催化就有使Luminol发光的效果,不必加H2O2,毕竟H2O2不稳定。
5楼2009-05-15 13:02:17
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