24小时热门版块排行榜    

查看: 1315  |  回复: 6

请教各位

新虫 (小有名气)

[求助] 连接转化 已有2人参与

做了两次连接转化,最后菌液pcr检测的时候只有二聚体条带,请问是没连接转化成功吗?有没有什么其他鉴定方法呢?

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你用的什么引物,菌p最好有一条引物是你载体上的,如何不确定连没连上,两条都用载体上的引物,看扩增出来的条带大小就知道连没连上了
2楼2019-03-11 16:16:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

请教各位

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wx1308897716 at 2019-03-11 16:16:59
不知道你用的什么引物,菌p最好有一条引物是你载体上的,如何不确定连没连上,两条都用载体上的引物,看扩增出来的条带大小就知道连没连上了

用的是当初pcr跑目的条带的引物

发自小木虫Android客户端
3楼2019-03-11 22:22:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lizimu566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
使用载体的通用引物PCR,可以提质粒酶切验证
4楼2019-03-12 11:15:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

请教各位

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lizimu566 at 2019-03-12 11:15:03
使用载体的通用引物PCR,可以提质粒酶切验证

克隆基因,胶回收后连接转化,算质粒酶切吗

发自小木虫Android客户端
5楼2019-03-12 12:11:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lizimu566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 请教各位 at 2019-03-12 12:11:53
克隆基因,胶回收后连接转化,算质粒酶切吗
...

不算啊,用你做PCR的菌液提质粒,在酶切验证
6楼2019-03-12 14:37:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

请教各位

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lizimu566 at 2019-03-12 14:37:07
不算啊,用你做PCR的菌液提质粒,在酶切验证...

我就是想单纯的验证一下我的目的基因连接转化到感受态上没,连接转化成功就送去测序了

发自小木虫Android客户端
7楼2019-03-12 19:35:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 请教各位 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥? +8 要乐观耀哥 2026-08-10 23/1150 2026-08-13 00:35 by 要乐观耀哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +8 majunge000 2026-08-10 9/450 2026-08-12 22:17 by 虫友是什么虫
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +10 Tide man 2026-08-11 10/500 2026-08-12 20:59 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 不应该看fileCode +5 且听虎啸 2026-08-12 6/300 2026-08-12 16:26 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见