24小时热门版块排行榜    

查看: 985  |  回复: 14
当前主题已经存档。

synhily

木虫 (正式写手)

[交流] 有没有什么方法快速提取酵母基因组?

有没有什么方法快速提取酵母基因组?我用普通的方法,要一天才能提好,很慢,如果要提取的数量多则是一件很费力的事情。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

renyjzx2008

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
synhily(金币+3,VIP+0):谢谢了,我先试试,如果可以,全部金币奉送!!! 5-14 18:40
synhily(金币+4,VIP+0):谢谢你的帮助,省了我的大事啦,哈哈 5-18 09:57
分子克隆上没有的,你可以照着这个方法去做:挑取酵母单克隆至含10μLddH2O的PCR管中,加入5μL5U/μL Lyticase混匀,30℃水浴10min,-80℃30min即得酵母基因组DNA。然后可以当模板直接用了,不但省时,而且适合大量样本的提取,效果很好的!
我自己前面做的时候也遇到不少问题,建议你自己多看看这方面的外文献。祝顺利!
8楼2009-05-14 13:04:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)

★ ★
synhily(金币+2,VIP+0):请问有没有摸好的菌落pcr条件啊,我用了一些方法还是不行,酵母细胞壁好厚呀。 5-12 19:30
干吗用
如果只是用PCR的话摸索一下菌落PCR条件吧
2楼2009-05-12 10:32:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuke009

铁杆木虫 (著名写手)

我们组都是用试剂盒提,多用点试剂即可
3楼2009-05-12 10:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨后郁金香

金虫 (小有名气)


synhily(金币+1,VIP+0):我用的是普通的方法,不是快速提取,我想请教的是能破掉酵母细胞壁的方法,也就是菌落PCR前的处理条件。 5-12 19:31
貌似分子克隆这本书上有酵母DNA的快速分离法啊~~~不知你用的是不是这个呵~~~
4楼2009-05-12 16:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

synhily

木虫 (正式写手)

各位有没有做菌落PCR前,处理酵母使其释放DNA的方法呢,这样就不用一整天一整天的提基因组了。谢谢。

PS:直接菌落我已经试过了,没有扩增出来,老师说是酵母细胞壁太厚了,基因组没有释放出来啊。
5楼2009-05-12 19:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aga0110125

银虫 (小有名气)

如果对基因组完整性要求不高,用热裂解很快,沸水煮个10min吧
6楼2009-05-13 10:57:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

synhily

木虫 (正式写手)

我煮了 还是没有啊
7楼2009-05-14 11:24:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

synhily

木虫 (正式写手)

楼上的虫虫能说的再明确些吗?我今天试了一下,没有扩增出来。按照您的方法处理后得到的模版还需要处理一下吗?(比如离心取上清)。模版的体积是全部的15微升还是一部分就够? 谢谢回答。。。
9楼2009-05-15 20:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaminl

铁杆木虫 (知名作家)

赞同八楼的说法
Nevergiveup!
10楼2009-05-15 22:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 synhily 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学调剂 +6 提神豆沙包 2026-02-28 6/300 2026-03-01 10:49 by sunny81
[考研] 0856求调剂285 +6 吕仔龙 2026-02-28 6/300 2026-03-01 10:03 by wang_dand
[硕博家园] 博士自荐 +6 科研狗111 2026-02-26 10/500 2026-03-01 10:02 by 科研狗111
[考研] 290求调剂 +6 材料专硕调剂; 2026-02-28 7/350 2026-03-01 09:21 by L135790
[考研] 272求调剂 +4 材紫有化 2026-02-28 4/200 2026-03-01 09:20 by L135790
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 284求调剂 +5 天下熯 2026-02-28 5/250 2026-03-01 08:49 by ms629
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 311求调剂 +8 南迦720 2026-02-28 8/400 2026-02-28 21:30 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[基金申请] 面上可以超过30页吧? +12 阿拉贡aragon 2026-02-22 13/650 2026-02-26 22:09 by Hahaxia
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见