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求助大家，我的主要问题是氨氮加氧酶（AMO）的提取及测量
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求助大家，我的主要问题是氨氮加氧酶（AMO）的提取及测量。 提取：根据文献中超声破碎条件，粗酶液制备过程为取15mL的污泥混合物，用pH = 7. 5的0.01mol/L磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液清洗三遍，重悬浮于pH = 7. 5 的缓冲溶液中，并进行超声破碎（一个周期超声15s，停置30s，共15min，置于冰水混合物中降温）。之后进行离心（9000rpm，离心10min）,上清液即为粗酶液。 测量：在两个相同的离心管(50 mL)中每管含有1ml粗酶液、1ml 氯化铵(5.6mmol/l)和8ml 0.01m磷酸盐缓冲液(pH=7.5)。离心管在30℃的空气浴中摇动24小时，然后立即离心，测定上清液中氨氮的残留量。 但是，结果不尽人意，明明硝化效果特别好的污泥，却测不出来氨氮的降低。求助有没有酶活的提取及测量的相关建议啊？ |
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