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Greg117

铜虫 (小有名气)

[求助] 菌落PCR

蓝白斑筛选阳性克隆
步骤:挑白色菌落至10ul无菌水,混匀后取1ul做菌落PCR,而后对于有条带的菌落取剩余菌液至5mlLB过夜培养提质粒。

结果:①菌落PCR有目标条带
         ②过夜培养的菌液啥都没长出来。

分析:①无菌水中菌液我4℃冰箱放了大概12h,难道菌株都死光了?
          ②培养基抗性浓度过高?我用的氨苄100ug/ml,上次直接菌落过夜培养能长出来。
希望做过的前辈能帮我看看,万分感激。

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