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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » jurkat细胞转染效率很低
汕头大学海洋科学接受调剂
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czbd2016

铜虫 (小有名气)

[求助] jurkat细胞转染效率很低

用lonza的nucleofector电转了jurkat细胞，但是效率很低，后来又尝试了脂质体2000还是不行，转不进去且细胞几乎全部死亡，有经验的战友请出来传授一下。
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1楼 2019-03-05 08:45:30
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幻夜落雪

银虫 (小有名气)
要不试下慢病毒转吧

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2楼2019-03-05 09:08:43
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)
先我想问楼主在转染前，你的细胞状态如何？如果细胞状态不好，用再好的试剂再好的方法都是没用的。我们实验室做转染时将siRNA 稀释液与RFECT稀释液混合，铺板在45%左右 。转染后4-6h就开始观察荧光了，然后48h小时后收细胞做mRNA水平检测 ，我觉得楼主要在确认细胞状态OK的前提下再去考虑转染的条件。
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3楼2019-03-05 16:34:40
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