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czbd2016

铜虫 (小有名气)

[求助] jurkat细胞转染效率很低

用lonza的nucleofector电转了jurkat细胞,但是效率很低,后来又尝试了脂质体2000还是不行,转不进去且细胞几乎全部死亡,有经验的战友请出来传授一下。
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幻夜落雪

银虫 (小有名气)

2楼2019-03-05 09:08:43
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

先我想问楼主在转染前,你的细胞状态如何?如果细胞状态不好,用再好的试剂再好的方法都是没用的。我们实验室做转染时将siRNA 稀释液与RFECT稀释液混合,铺板在45%左右 。转染后4-6h就开始观察荧光了,然后48h小时后收细胞做mRNA水平检测 ,我觉得楼主要在确认细胞状态OK的前提下再去考虑转染的条件。
3楼2019-03-05 16:34:40
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