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产甲烷菌中辅酶F420的观察。 已有1人参与
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最近老师让用接种液观察是否含有辅酶F420，关于实验过程，我用的是紫外滤光片，20倍物镜，10倍目镜观察，视野区呈现的紫色感觉像是盖玻片上的杂质的颜色，因为也是刚开始课题，好多都不明白，有没有懂得的人帮我解答一下 发自小木虫Android客户端 |
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quiller2000
木虫 (著名写手)
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- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2019-03-05 22:08:26
3楼2019-03-06 19:23:27
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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以下是我在读期间查的资料，现在上班2年了，如果有进一步文献需求，可以给我个帐号我发给你哈，希望对你有帮助，有用就给个奖励呀。 辅酶F420的测定：采用分光光度法 1.首先取发酵液泥水混合物 20 mL，加入 40 mL 的 0.9%生理盐水，然后在 6000 r/min 条件下离心 15 min，弃去上清液，向沉淀中再加入 40 mL 生理盐水使沉淀悬浮，在 6000 r/min 条件下再离心 15 min，同样弃去上清液。向沉淀中再加入 30 mL 的 0.9%生理盐水 使沉淀悬浮，然后在 95～100 ℃水浴中保温 20 min，不断搅拌污泥以使其受热均匀； 达到时间后取出冷却，记录下污泥体积值，以乙醇:污泥：水=2.5:1 的比例加无水乙醇， 搅拌混合均匀，然后 6000 r/min 离心 10 min 取上清液，将亮黄色上清液分为两份，分别 测定溶液的吸光度。一份用4 mol/L的 NaOH溶液调节pH至13.5待测，另一份用6 mol/L 的 HCl 调节 pH<3.0 作为参比，在 420 nm 波长下用分光光度计测量吸光度值，然后根据 吸光度值进行计算。 2. 结果计算 C= (A1-A0)×f/ε×L，式中：C—辅酶 F420浓度，单位 mmol/L；A1— pH13.5 的待测样在 420 nm 吸光度值；A0—参比样在 420 nm 吸光度值；f—样品稀释倍数；L—比色皿厚度，单位 cm；ε—辅酶F420的消光系数，单位L/(cm•mmol)，在pH=13.5时，ε=54.3 L/(cm•mmol)。求出污泥混合液的辅酶 F420的浓度 C 后，可以根据污泥混合液的 TS 浓度求出污泥内辅酶 F420的浓度，计算公式为：CX=C/X，式中：CX 为单位质量污泥中酶 F420的含量，mmol/g；X 为单位体积污泥中污泥的质量，g/L。 |
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孤城闭4楼2019-03-06 19:30:37
5楼2019-03-16 14:32:15
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