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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母单杂菌落检测
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小白菜000

新虫 (初入文坛)

[交流] 酵母单杂菌落检测

有人做过酵母单杂吗？  Y1H-GOLD系统，我转化后菌落检测用基因扩增引物检测都有目的条带，用takara的Matchmaker??Insert Check PCR Mix 1?检测都是两天带，一个有人知道什么情况吗？？

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1楼 2019-03-04 18:14:49
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欧易 李炼

新虫 (小有名气)
我做过

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2楼2019-03-04 23:49:50
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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)
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为啥我bait转感受态细胞，长得都是大肠杆菌呢？

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竹杖芒鞋轻胜马，谁怕，一蓑烟雨任平生；回首向来萧瑟处，归去，也无风雨也无晴
3楼2019-03-05 00:06:14
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puppet493

新虫 (初入文坛)
★
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什么意思？用自己的引物扩增有目的条带？不是应该来验证是否整合到酵母上吗

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4楼2019-03-05 17:19:58
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小白菜000

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 欧易 李炼 at 2019-03-04 23:49:50
我做过

takara的Insert Check PCR Mix 1检测出现两条带，一条是目的条带，2000kb.左右，一条是空载的大小的条带，1400左右。知道什么原因么？

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5楼2019-03-05 22:58:44
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小白菜000

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by puppet493 at 2019-03-05 17:19:58
什么意思？用自己的引物扩增有目的条带？不是应该来验证是否整合到酵母上吗

检测整合到基因组，会有两个条带，很郁闷。

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6楼2019-03-05 22:59:45
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欧易 李炼

新虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by 小白菜000 at 2019-03-05 22:58:44
takara的Insert Check PCR Mix 1检测出现两条带，一条是目的条带，2000kb.左右，一条是空载的大小的条带，1400左右。知道什么原因么？
...

可能是质粒有点问题

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7楼2019-03-06 01:01:03
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小白菜000

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by MAS_rice at 2019-03-05 00:06:14
为啥我bait转感受态细胞，长得都是大肠杆菌呢？

污染了吧

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8楼2019-03-06 19:32:51
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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)
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8楼: Originally posted by 小白菜000 at 2019-03-06 19:32:51
污染了吧
...

之前没加抗生素，现在加了，可是酵母好像也没长起来

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竹杖芒鞋轻胜马，谁怕，一蓑烟雨任平生；回首向来萧瑟处，归去，也无风雨也无晴
9楼2019-03-06 23:26:50
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小白菜000

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by MAS_rice at 2019-03-06 23:26:50
之前没加抗生素，现在加了，可是酵母好像也没长起来
...

氨苄kana等抗生素对酵母没作用的。放心

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10楼2019-03-07 00:12:59
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