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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助电泳问题
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sndxy

[交流] 求助电泳问题

我用盐析法分离蛋白，得到的蛋白想用电泳检测一下，蛋白可以直接上样跑电泳还是透析后再跑电泳。另外求助2倍上样缓冲液的配方。还有如果要透析透析袋装多少溶液为宜，谢谢指教。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-1 at 13:11 ]
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1楼 2009-05-11 07:37:46
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xiaoyuan622

金虫 (小有名气)
不透析可以电泳的，只是盐太多条带不是那么好看而已。特别是邻近条带盐浓度不要差太多，不然就会跑歪了。


2×SDS凝胶加样缓冲液  组分（摘自《分子克隆》第三版）
Tris-HCl  pH6.8（100 mM）；SDS （4%）；溴酚兰（0.2%）；甘油（20%）；β-巯基乙醇或二硫苏糖醇（200 mM）
不含硫代试剂的加样Buffer可在室温保存。β-巯基乙醇或二硫苏糖醇临用前加入。



透析袋使用：通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。。
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2楼2009-05-11 11:19:31
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sndxy

非常好，谢谢
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3楼2009-05-11 14:12:37
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