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19920311yrr

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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在线: 41.7小时
虫号: 3144534
注册: 2014-04-17
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 求助一氧化氮含量检测问题已有1人参与

一氧化氮含量检测问题
使用的DAF-FM DA(NO荧光探针），检测样品为藻类，问题未作处理的细胞内NO含量变化幅度较大，与实验组差异不显著
具体操作：收集细胞后装载探针：按照1:1000比例，用试剂盒提供的DAF-FM DA稀释液稀释DAF-FM DA，使终浓度为5微摩尔/升。细胞收集后，用稀释好的DAF-FM DA重悬细胞，细胞浓度为一百万至二千万/毫升，37℃细胞培养箱内孵育30分钟。上述操作在离心管内进行。放置在摇床上使药品混匀，使探针和细胞充分接触。用PBS(pH7.4)洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DAF-FM DA。用荧光酶标仪检测。使用495nm激发波长，515nm发射波长，逐时间点检测刺激前后荧光的强弱。

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