24小时热门版块排行榜    

查看: 477  |  回复: 6
当前主题已经存档。

胡笳桃子

新虫 (小有名气)

[交流] XhoI和BstXI的双酶切问题?

买的是Takara的内切酶。
两者buffer相同,但是前者酶切温度是37度,后者为45度;如何双切呢?是要分步切还是可以选择折中的温度同步切?
回复此楼

» 猜你喜欢

赠人玫瑰,手有余香。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

建议分布

哇,takara的内切酶,楼主好好摸一下酶切时间吧
2楼2009-05-09 13:52:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡笳桃子

新虫 (小有名气)

时间?好像没什么的吧?
之前做过10ul体系的小切。先加低温条件的内切酶0.25ul,2h后再加高温条件的内切酶0.25ul,2h后发现可以切得很好。
但如果要大切的话,体系就会比较大,不能这么做。
赠人玫瑰,手有余香。
3楼2009-05-09 14:19:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

2h………………
我都是几分钟到1h搞定,因为takara的东西……
4楼2009-05-09 14:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

忘了说,我用的是NEB的~~~不用切2h那么久,切久了也没用
5楼2009-05-09 14:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡笳桃子

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-5-9 13:52:
建议分布

哇,takara的内切酶,楼主好好摸一下酶切时间吧

你是说切一个酶,回收后再切另一个么?
时间是什么意思啊?
赠人玫瑰,手有余香。
6楼2009-05-09 14:22:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

takara的酶活性很不好,假如载体没有切干净就去做连接转化,到时候空的几率很大
因为超螺旋质粒很快进入感受态

不需要回收,到时候提高温度加另外个酶即可
7楼2009-05-09 16:58:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 胡笳桃子 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +4 junqihahaha 2026-03-26 4/200 2026-03-26 12:36 by 张凯十八号
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +4 kongweilin 2026-03-26 6/300 2026-03-26 10:06 by 咪呜喵呜
[考研] 311求调剂 +4 勇敢的小吴 2026-03-20 4/200 2026-03-25 18:12 by xcjcqu
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 材料与化工考研调剂 +9 孅華 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:09 by cmz0325
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 求调剂323材料与化工 +4 1124361 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:19 by shulmg
[考研] 299求调剂 +7 shxchem 2026-03-20 9/450 2026-03-25 10:41 by lbsjt
[考研] 286求调剂 +11 Faune 2026-03-21 11/550 2026-03-25 10:11 by 雾散后相遇lc
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见