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zhenzhen527

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR难题

大家帮我分析一下吧,我现在都没辙了。普通PCR以前能扩出来,但现在一样的体系就扩不出来了,什么都没了,连二聚体都没了。上了下荧光定量,结果峰达三四个之多。因为我用的是pcrmix,所以除此之外,几乎所有的因素都考虑了,所以就考虑模版了,重新提RNA转录后PCR,内参全部扩出,但目的基因只有一半扩出,上了定量,依旧有三四个之多,怎么回事呀?想不通了我,试验紧急,望各位帮忙分析!小妹不甚感激!

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:00 ]
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longfeng

金虫 (小有名气)

1.引物非特异性扩增
2.污染奥
3楼2009-05-15 14:10:52
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xlongw1773

金虫 (小有名气)

博士

引物特异性不够,重新设计引物。
123
2楼2009-05-08 14:13:50
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695

木虫 (职业作家)

引物非特异性扩增
4楼2009-05-15 23:34:51
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