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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)


[资源] siRNA对Hela细胞高效转染

Hela细胞系难以控制,此细胞系有时会污染同一实验室的其他细胞培养物(cell culture),干扰生物学的研究。污染程度难以估计,因为研究人员很少检定已确立细胞系的本质和纯度。据说有相当数目的体外细胞系(in vitro cell lines)其实就是HeLa细胞系,因为原先的细胞株已被快速增殖的HeLa细胞系污染物取代了。   有学者认为此细胞系是一新的 物种,因为此细胞株能自行繁殖和散布。在1991年此细胞株被命名为Helacyton gartleri。   Hela细胞生长奇快,甚至超越一般癌细胞。Hela细胞经历细胞分裂时可维持端粒酶活性以维持 端粒长度,一般细胞的端粒会随着老化而变短,终至细胞死亡。海乐细胞利用此机制避开海佛烈克极限(Hayflick limit)。
 得益于Hela细胞, 基因检测的原理才被发现。1953年,一位用Hela细胞进行实验的研究人员发现,一种名为苏木苏的着色剂能够让细胞核的染色体清晰可见,利用这一发现,科学家成功找出了 唐氏综合症等疾病的遗传联系,并逐渐掌握遗传性疾病的诊断方法。          1954年,Hela细胞帮助科学家实现了 细胞克隆。科学家利用其具有顽强生命力的特征,发明了一种分离单一细胞的方法,并让其存活足够长的时间来复制和创造一个自身的完美拷贝。这一重大突破为 动物克隆、 基因疗法、试管受精和干细胞分离等尖端生物医学奠定的基础。
1965年,Hela细胞帮助实现了基因混合。通过将海拉细胞和 小鼠细胞融合,人类首次创造了跨物种混合体。基因泥合技术不仅让人们成功绘制 人类基因图谱、进行血型鉴定,也带动了抗癌药物赫塞汀的发明。另外,小鼠和人的Hela细胞中的 氯霉素抗性的遗传属于染色体处遗传,该抗性和线粒体有关。
1973年,科学家利用Hela细胞模型 沙门氏菌的扩散,测定其传染性,研究其在人体细胞中的活动。
1993年,研究人员让Hela细胞感染 结核杆菌DNA,明白了细菌如何侵袭人类细胞。
附件为RFect siRNA对Hela细胞高效转染的相关文献,仅供参考
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  • 附件 1 : RFect_siRNA转染试剂对Hela细胞的高效转染.pdf
  • 2019-02-11 11:59:16, 13.79 M

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czbd2016

铜虫 (小有名气)


感谢楼主的分享,研究者使用qRT-PCR和Western blot方法检测宫颈癌Hela细胞及正常宫颈上皮细胞H8中YAP1的表达,siRNA YAP1转染Hela细胞沉默YAP1表达,并以转染control siRNA的细胞作为对照,转染48h后,分别用qRT-PCR和Western blot方法检测沉默效果。用MTT法检测沉默后细胞增殖情况。Transwell检测细胞侵袭能力。
4楼2019-02-11 15:01:27
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2019-02-11 13:12   回复  
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