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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 请各位兄弟姐妹帮忙看看我的细胞培养出来的是什么，正常吗？
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iawgu

[交流] 请各位兄弟姐妹帮忙看看我的细胞培养出来的是什么，正常吗？

我培养的是人乳腺癌细胞（MCF-7），下面两张图是我加细胞培养和未加细胞只用培养液培养出来的细胞图，加细胞培养出来的图还算正常，未加细胞的对照图却有很大的问题，可以看到在显微镜视野下遍布着小的颗粒，有人知道小颗粒是什么吗（个人怀疑是霉菌），中间哪个环节出问题会造成这样的结果呢？

图一：DMEM培养液，37℃，5% CO2 下培养MCF-7细胞，40X图






图二：同图一条件，未加入细胞，只用培养液培养，一晚上出来这么多小东西，谁知道是什么啊？
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1楼 2009-05-06 18:58:07
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冷面书生

木虫 (正式写手)
★ ★
黑色腰带(金币+2,VIP+0):谢谢参与 9-14 02:00
首先，你的培养液有污染是毫无疑问的，当然并不是说发生重大的微生物污染，你可以注意自己所用容器及耗材的清洁；至于培养板（瓶）底部的透明小圆点，不知道你是否可以观察到它的移动，如果移动的话，我认为那是衣原体或支原体，这一大类小微生物靠0.22微米滤膜是无法除菌的，建议你换0.1微米的滤膜。
并非只是未加细胞的培养物质中观察到污染，其实你上一图片中也有这些东东。不过以我的经验来说，这些东东对结果影响并不是太大，当然得看你的实验指标了。

[ Last edited by 冷面书生 on 2009-5-6 at 19:38 ]
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2楼2009-05-06 19:36:02
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iawgu

谢谢解答，很详细！
另外还有一个问题，我的加细胞的培养液第二天总是变成澄清的黄色，是怎么回事？

[ Last edited by iawgu on 2009-5-7 at 16:12 ]
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3楼2009-05-07 16:10:07
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tjqiuhong

金虫 (正式写手)

有污染

★
黑色腰带(金币+1,VIP+0):谢谢参与 9-14 02:00
个人认为污染的微生物代谢很快，是培养液的PH值迅速发生了变化
赞一下(6人) 回复此楼
4楼2009-05-07 19:42:54
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tjqiuhong

金虫 (正式写手)

直接更换培养液

★
黑色腰带(金币+1,VIP+0):谢谢参与 9-14 02:01
直接更换培养液
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5楼2009-05-07 19:43:36
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apple阿俊
6楼2009-05-19 14:23:10
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cpuwzq

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
黑色腰带(金币+1,VIP+0):谢谢参与 9-14 02:01
我也培养过MCF-7，我觉得你的细胞形态不大对，7应该很紧密、像单克隆样生长，这个就不讨论了。从两张图看肯定是染菌了，而且不是支原体污染（否则看不到）。如果只是收蛋白，可直接操作；或者直接丢掉。建议不要用于其它方面。
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7楼2009-09-13 20:00:21
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psfan

铁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我看到我的培养基里好像有絮状悬浮物，是否过滤一下还可以用？
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8楼2009-10-26 17:01:42
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nick.nye-0313

铜虫 (小有名气)
污染了，重新来吧！
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只为成功找方法
9楼2010-01-28 16:01:33
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