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[交流] ：【求助/交流】+杂交瘤细胞不长啊

请教各位大虾:我现在在做单抗细胞培养,最近很长一段时间细胞融合后总是克隆很少,就算偶尔克隆多的时候一扩大培养就死掉.我已经更换了PEG,HT,A,血清也换成Gibco的了,我确定不是融合技术层面上的东西,各位有没有什么高见?很郁闷的事:细胞镜检时背景很脏,24孔培养时易聚团易死!

1楼 2009-05-06 16:42:22

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金虫 (正式写手)

估计还是你培养的有问题，如果细胞融合出来以后，经过筛选，扩大培养应该没有问题；我这边试验室一直在做，只要不是技术问题，做了这么多年一直很好！

3楼2009-05-11 11:10:31

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怎么有人看没人回呢？大家伙都没碰到过这种情况吗？

2楼2009-05-11 08:33:12

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培养的人已经做过很多年很有经验了啊,sp2/0或小鼠鼠型出了问题是不是也会有融合不好的情况啊?

4楼2009-05-11 11:25:51

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金虫 (正式写手)

貌似细胞密度太大太小都不利于生长。据说是缺乏细胞分泌的一些因子。听别人建议过，如果杂交瘤细胞密度太小长不好，可以用新鲜培养液养对数期的同种细胞，12h后过滤，1：1加新鲜培养基，再拿来养杂交瘤细胞。
我没试过，不过换液时留一点旧培养液好像对我的杂交瘤细胞比较好。

5楼2009-05-11 12:16:04

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