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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：有谁做过 TM Mismach ？求教
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huangteyue

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助：有谁做过 TM Mismach ？求教

RT


TM Mismach   ；


ex：

原始序列：NO.1  .。。。 TAC AGT CGG ATT AGA TGT TGA TAC A。。。。

                 NO.2    。。。TAC AGT CGG ATT AGA TGT TGA TAC T。。。。

设计的 Primer F ：            TAC AGT CGG ATT AGA TGT TGA TAC G




目标：设计的引物能扩增 序列1；但不能扩增出序列2（利用最后一个碱基的不同）


求方法。。。感激不尽



第一次发帖，不会设悬赏，汗一个先，有合适的答复悬赏 30J

[ Last edited by huangteyue on 2009-5-6 at 13:36 ]
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1楼 2009-05-06 12:58:14
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
这个很困难，首先你得用扩增能力最垃圾的Taq酶（而且记得没有任何保真度）
错配尽量多发生在3'端，越多越集中越好

其实建议，还是用酶切或者测序一类的吧
只差别一个碱基还是能够扩出来的
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2楼2009-05-06 13:11:30
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huangteyue

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-5-6 13:11:
这个很困难，首先你得用扩增能力最垃圾的Taq酶（而且记得没有任何保真度）
错配尽量多发生在3'端，越多越集中越好

其实建议，还是用酶切或者测序一类的吧
只差别一个碱基还是能够扩出来的

谢谢！

有没有什么方法，（假设：提高ATP浓度，降低TTP浓度，有这样的做法么？）可以让 G-A配对，而G-T不配对？


期待高人出现
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3楼2009-05-06 13:22:22
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
GA和GT怎么样都不会配对的吧…………
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4楼2009-05-06 14:13:24
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