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rosesea1989

木虫 (小有名气)

[求助] 霉菌DNA提取 已有1人参与

我是用的天根的细菌提取试剂盒 PCR扩增后电泳没有跑出来 请问是我试剂盒选择的问题吗 还是霉菌有专门的试剂盒？
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我是学泡一碰就碎
1楼 2019-01-21 15:46:52
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匿名

★ ★
rosesea1989(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-01-24 12:45:40
本帖仅楼主可见
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2楼2019-01-21 15:55:30
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美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做
霉菌提取可以试试CTAB方法

发自小木虫IOS客户端
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3楼2019-01-21 17:41:32
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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rosesea1989(西门吹雪170代发): 金币+4, 鼓励回帖交流 2019-01-24 12:45:57
应该是你选择盒子的问题，你选择的细菌基因组盒子，这个是基本上都是原核生物，例如格兰仕阴性或者阳性，目前阳性的不怎么好做
霉菌是真核生物，无论是细胞结构还是细胞内含物都和原核有区别
再者，一般提前完基因组先进行琼脂糖凝胶电泳检测，如果没有条带基本上就不要往下做了，模板有问题那就没有结果的
建议考虑用溶菌酶、酵母破壁酶或机械方式协助破壁，天根没有结果的主要原因可能就是没有有效破壁，如果有条件的话，可以通过显微镜观察裂解前后的图片，如果裂解充分，那只能说明天根的体系不适合提取霉菌
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4楼2019-01-22 08:41:34
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rosesea1989

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 千羽羽 at 2019-01-21 15:55:30
你提取DNA后就跑个电泳看一下，有没有条带，这样可以初步检测下dna提取效果好不好，如果有条带，那就是你的DNA提取没问题，只是后来的PCR没成功，那就可能是引物，或者条件不合适了
...

不扩增能跑出来吗
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我是学泡一碰就碎
5楼2019-01-24 11:06:41
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rosesea1989

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 美亿美生物 at 2019-01-21 17:41:32
霉菌提取可以试试CTAB方法

没查到 能具体说明一下吗
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我是学泡一碰就碎
6楼2019-01-24 11:07:07
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rosesea1989

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by elmanbio at 2019-01-22 08:41:34
应该是你选择盒子的问题，你选择的细菌基因组盒子，这个是基本上都是原核生物，例如格兰仕阴性或者阳性，目前阳性的不怎么好做
霉菌是真核生物，无论是细胞结构还是细胞内含物都和原核有区别
再者，一般提前完基因 ...

加了玻璃珠 但是没有扩增直接跑电泳能跑出来条带吗
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我是学泡一碰就碎
7楼2019-01-24 11:08:51
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elmanbio

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by rosesea1989 at 2019-01-24 11:08:51
加了玻璃珠 但是没有扩增直接跑电泳能跑出来条带吗...

可以
细菌基因组可以跑出来的
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8楼2019-01-24 11:59:14
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rosesea1989

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by elmanbio at 2019-01-24 11:59:14
可以
细菌基因组可以跑出来的...

细菌跑出来了 美军的没有条带
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我是学泡一碰就碎
9楼2019-01-24 14:03:11
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elmanbio

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by rosesea1989 at 2019-01-24 14:03:11
细菌跑出来了 美军的没有条带...

那就没有必要跑pcr了，换试剂盒
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10楼2019-01-24 14:26:06
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