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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 原核表达His标签融合蛋白，能用镍柱纯化，但是与his单抗做wb不反应，求解
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lincoln_jzg

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达His标签融合蛋白，能用镍柱纯化，但是与his单抗做wb不反应，求解 已有1人参与

请问各位大神有没有遇到这种情况，原核表达的目的蛋白蛋白带有his标签，能够用镍柱纯化得到，但是与his单抗做wb不反应，求解，感谢！
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我科研，我快乐！
1楼 2019-01-14 10:07:24
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
His标签和抗体的亲和力比较弱，是uM级别的，你的蛋白的结构折叠可能会进一步影响His标签对抗体的结合。
建议你用抗该抗体的蛋白进行WB实验。
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2楼2019-01-15 14:47:17
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