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喵咪咪小乖乖

新虫 (初入文坛)

[求助] 鲁米诺化学发光用G-四联体/血红素和双氧水体系来催化,用荧光仪测到有荧光峰 已有1人参与

鲁米诺化学发光用一段含有G-四联体的DNA加入血红素形成DNA酶,加入双氧水后,反应一段时间,看到文献上说鲁米诺化学发光的出峰位置在425nm,然后试了一下,将激发波长改为350nm,测出来的发射峰在411nm左右,(1)单纯的鲁米诺溶液在EX=350nm, Em=411nm左右,荧光强度非常强,(2)鲁米诺+过氧化氢:EX=350nm, Em=411,荧光强度和(1)差不多;(3)鲁米诺+过氧化氢+血红素后,荧光强度就非常高,
有一次将激发波长设成了425nm,然后(1)鲁米诺自身和(2)鲁米诺+过氧化氢都没有荧光峰,但是(3)鲁米诺+过氧化氢+血红素就有很强的荧光信号
这些都是在没有形成DNA酶的情况下自身就有很强的荧光强度,这是怎么回事?

难道不是这样测吗?请问有用荧光仪测鲁米诺化学发光信号的吗?
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)

低调务实!
5楼2019-03-03 01:30:58
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dkfasdlkf

捐助贵宾 (文坛精英)

易析科技


【答案】应助回帖

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不同激发波长出来的结果不同的呀,要找到一个合适的激发
2楼2019-01-11 17:18:59
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喵咪咪小乖乖

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dkfasdlkf at 2019-01-11 17:18:59
不同激发波长出来的结果不同的呀,要找到一个合适的激发

这个是知道的,但是鲁米诺一般应该是用化学发光仪器来测,我看到文献上的用化学发光测出来的峰位置在425nm左右,但是化学发光仪器应该没有激发波长,所以我就用荧光仪试出来感觉激发波长是350nm左右,但是鲁米诺自身就有很强的化学发光吗?不是需要酶催化以后才产生化学发光吗?
3楼2019-01-14 09:17:30
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)

低调务实!
4楼2019-03-03 01:28:48
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