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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 需要从污水里分离出来的大肠杆菌噬菌体和链球菌噬菌体
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亮仔儿061

新虫 (初入文坛)

[求助] 需要从污水里分离出来的大肠杆菌噬菌体和链球菌噬菌体 已有2人参与

以前从污水里分离出来的噬菌体复苏不出来了，马上要做动物实验了  兔子子宫内膜炎的预防和治疗实验  可是噬菌体没有了   哪位有噬菌体的虫友可以帮助一下吗？万分感谢呀

@天使托 发自小木虫Android客户端
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1楼 2019-01-03 07:15:29
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注册这货

木虫 (正式写手)
你好，我没有噬菌体，是想跟您请教一下噬菌体分离的方法。方便的话还请告知一下，非常感谢！

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Lifeislonely,youneverfeelit.
2楼2019-01-04 00:16:51
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爱相随-12

捐助贵宾 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小冀-: 金币-5, 屏蔽内容, 违规存档, 疑似广告，本帖禁止一切形式的广告，请慎重回帖 2019-01-07 13:08:33
本帖内容被屏蔽
3楼2019-01-04 11:01:03
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Sherlocke

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好，可以分享一下噬菌体的分离方法吗？目前也是做这一块的，可是噬菌体分离不出来求大神赐教！

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4楼2019-01-07 09:39:02
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亮仔儿061

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
小冀-: 金币+5, 鼓励回帖，有帮助 2019-01-19 14:47:06
引用回帖:
2楼: Originally posted by 注册这货 at 2019-01-04 00:16:51
你好，我没有噬菌体，是想跟您请教一下噬菌体分离的方法。方便的话还请告知一下，非常感谢！

污水静置取上清4℃5000转离心20分钟绿叶，过滤。初次培养：上述滤液取100ml，加入100ml2倍的液体培养基，加入2ml菌，加入适量的氯化钙（我用的终浓度是1mmol/L），混匀室温静置1h，37℃50转培养过夜。增殖培养：上述培养液4℃12000转离心30分钟，过滤，取滤液0.5ml加入到ml的液体培养基里，加入0.2ml宿主菌、氯化钙，室温静置1h，37℃ 50转培养3-5小时。此过程重复3-5次。点滴法验证或是倒双层平板。

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5楼2019-01-19 10:18:53
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亮仔儿061

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Sherlocke at 2019-01-07 09:39:02
您好，可以分享一下噬菌体的分离方法吗？目前也是做这一块的，可是噬菌体分离不出来求大神赐教！

污水静置取上清4℃5000转离心20分钟绿叶，过滤。初次培养：上述滤液取100ml，加入100ml2倍的液体培养基，加入2ml菌，加入适量的氯化钙（我用的终浓度是1mmol/L），混匀室温静置1h，37℃50转培养过夜。增殖培养：上述培养液4℃12000转离心30分钟，过滤，取滤液0.5ml加入到ml的液体培养基里，加入0.2ml宿主菌、氯化钙，室温静置1h，37℃ 50转培养3-5小时。此过程重复3-5次。点滴法验证或是倒双层平板。

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6楼2019-01-19 10:19:19
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注册这货

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 亮仔儿061 at 2019-01-19 10:18:53
污水静置取上清4℃5000转离心20分钟绿叶，过滤。初次培养：上述滤液取100ml，加入100ml2倍的液体培养基，加入2ml菌，加入适量的氯化钙（我用的终浓度是1mmol/L），混匀室温静置1h，37℃50转培养过夜。增殖培养：上 ...

非常感谢楼主

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Lifeislonely,youneverfeelit.
7楼2019-01-19 19:03:54
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wmm0128

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 亮仔儿061 at 2019-01-19 10:18:53
污水静置取上清4℃5000转离心20分钟绿叶，过滤。初次培养：上述滤液取100ml，加入100ml2倍的液体培养基，加入2ml菌，加入适量的氯化钙（我用的终浓度是1mmol/L），混匀室温静置1h，37℃50转培养过夜。增殖培养：上 ...

你好，请问过滤的滤膜是什么尺寸的？

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8楼2019-04-01 16:43:11
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wardwaads

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 亮仔儿061 at 2019-01-19 10:19:19
污水静置取上清4℃5000转离心20分钟绿叶，过滤。初次培养：上述滤液取100ml，加入100ml2倍的液体培养基，加入2ml菌，加入适量的氯化钙（我用的终浓度是1mmol/L），混匀室温静置1h，37℃50转培养过夜。增殖培养：上 ...

您好，方法很详细，请教您一个问题？
大肠杆菌有没有什么要求，我知道需要噬菌体敏感型菌，ATCC指定了E.coli 15597。是否有其他可用的菌的名单？
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9楼2019-07-31 11:14:08
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