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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助，毛细管电泳的老化问题
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liranhong

铁虫 (小有名气)

[交流] 求助，毛细管电泳的老化问题

新手，刚开始做毛细管电泳，有几个问题想请高人指点：
1、新的毛细管要如何老化
2、我用的是加了SDS的buffer分析的，有时候就会电流断流，请问这是毛细管堵了吗？如果是堵了，这时应该怎么冲呢？
3、我的样品溶液是比如四氯化碳、氯仿、乙腈这样的有机溶剂，压力进样，这些溶剂会对管子有伤害吗？

PS:我用的是安捷伦的仪器，和贝克曼的差别大吗？

[ Last edited by 佳怡 on 2009-5-11 at 15:07 ]
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1楼 2009-05-03 11:09:49
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yiyayiyayo

铁虫 (小有名气)
★ ★
liranhong(金币+2,VIP+0):解释的很详细 5-4 14:12
1. 新毛细管一般用醇（甲醇或乙醇）、酸（HCl）、碱（NaOH）、水的顺序处理；
2. 是不是堵了很好判断，用压力冲洗，能冲通就没堵。没电流的情况除了堵还有其它原因。不知你的电流有多大？最好buffer用膜过滤再做。此外，样品的溶液是非极性很强的，估计这是造成段电的原因。
3. 这些溶剂对毛细管内壁不会伤害，但是会溶解外壁的聚合物膜

PS:两个牌子的仪器当然有区别，理论上来说贝克曼的是最好的。
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2楼2009-05-03 15:09:20
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liranhong

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yiyayiyayo at 2009-5-3 15:09:
1. 新毛细管一般用醇（甲醇或乙醇）、酸（HCl）、碱（NaOH）、水的顺序处理；
2. 是不是堵了很好判断，用压力冲洗，能冲通就没堵。没电流的情况除了堵还有其它原因。不知你的电流有多大？最好buffer用膜过滤再做 ...

能具体说说新毛细管老化的步骤吗？一般都是冲多长时间啊，酸碱的浓度是多少呢？
我的电流是刚开始的1、2分钟里有电流，然后直接就降为0了，不过最近又遇到了电流刚开始是正常的，但1、2分钟后就开始降低，从60微安降到20、10微安左右，让后又会升上去，光谱图中这段时间的基线很不稳，请问这又是什么问题呢？用碱、水冲了还是这样
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3楼2009-05-04 14:11:58
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cpn

木虫 (正式写手)
★ ★
liranhong(金币+2,VIP+0):很详细 5-5 10:11
酸碱的浓度好像0.1M-1M的都有人用，我现在用的beckman的，用的是1M的，这应该看管子的情况吧。一般活化管的话至少要各10min以上。
掉电流不一定是管堵了，有可能是SDS加多了，产生气泡进到管子里了，在加高压的情况下，有可能引起电流急剧下降且不可逆。
堵了的话就加大压力冲管，还是用原来的压力冲管的话恐怕不大管用。再不行就摘下来用通管器冲管。
不知道你那安捷伦的仪器是长什么样的，以前我用过一台lumex的冲管可以在出口端看见有水珠流出，以此判断有没有堵。不过现在用的beckman的就不行了，只能换个空的废液瓶，等冲管一段时间后拿出来看看瓶子里面有没有液体冲出来判断。
那些有机溶剂对裸管的内壁不会有害，但是如果你的管子内壁有弄涂层的话，就不一定了。

[ Last edited by cpn on 2009-5-4 at 18:24 ]
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4楼2009-05-04 18:23:14
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