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三磷酸腺苷铁杆木虫 (职业作家)
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[交流]
胰酶会不会破坏层黏连蛋白laminin?
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今天收蛋白做western,突然想到一个问题 我做的是层黏连蛋白laminin的γ1亚基 以为之前忘了传一皿细胞,就把保种的细胞先用胰酶消化,取一部分悬液然后离心,弃上清后加裂解液收蛋白 但是lamc1是个胞外蛋白,这样加胰酶消化之后,会不会就把我的目的蛋白给切得乱七八糟了呢? 平时我收蛋白都是刮细胞下来做的…… 不知道有没有人做过胞外蛋白,交流下经验 PS:膜蛋白用胰酶消化是没事的,除非消化过度 |
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