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络石刀

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:做WB检测p-STAT3,p-STAT3能够检测到,但是total stat3无条带怎么回事?

如题,我最近做蛋白电泳实验的时候,检测磷酸化STAT3, 这个可以检测到,但是想测总的STAT3的时候总是做不出来。刚开始以为是做stripping的时候时间太长导致蛋白损失过多,但是后面我拿样品直接测total STAT3(就是第一次孵一抗直接孵STAT3,不做stripping)还是测不出来。用的是CST的抗体,跟厂家联系了拿了一支新的抗体还是做不出。这个情况是近三个月才出现的,更早之前还是能做出来的。而且做其他的任何抗体都没有问题,就这一个做不出来。请各位大神帮忙看看可能有什么原因。多谢
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