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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 96孔板培养生物膜的问题
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hujinling

新虫 (初入文坛)

[求助] 96孔板培养生物膜的问题

在96孔聚苯乙烯微孔培养板中每孔加入100μl培养液，接种100μl过夜培养菌液，37°C静置孵育24h；
(2)将培养液吸出，每孔加入200μl无菌PBS缓冲液清洗板孔3次；
(3) 每孔加入100μl甲醇固定15min，然后吸出培养孔中的甲醇，自然风干；
(4) 每孔加入100μl 1%结晶紫溶液，室温下染色20min；
(5) 吸出培养孔中的结晶紫染色液后，用pbs把多余的染料冲洗干净；
(6) 把培养板倒置在滤纸上除去残余的水，并在37°C烘箱中烘干或室温凉干；
(7) 完全干燥后，每孔加入100μl 30%冰乙酸溶液，在37°C培养箱中作用30min以溶解结晶紫；
(8) 590nm条件下，用酶标仪测定培养孔中溶液的OD值；
这是我的实验步骤，但是我在清洗的时候看到很多浮游的块状物请问这是生物膜吗，我怎么样清洗才能洗的干净又不破坏生物膜

@天使托 发自小木虫Android客户端
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细菌生物膜制备和染色

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1楼 2018-12-25 15:20:31
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hujinling

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chentao1204 at 2018-12-26 14:31:34
我也遇到这种现象，请问你找到原因了吗？

我做好几次了都这样要不就是洗不干净要不就是啥都洗没了，咱两加微信交流找下原因吧

发自小木虫Android客户端
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3楼2018-12-26 15:06:43
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chentao1204

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hujinling at 2018-12-26 15:06:43
我做好几次了都这样要不就是洗不干净要不就是啥都洗没了，咱两加微信交流找下原因吧
...

给你站内发消息了
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2018-12-26 17:38:39
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axxxx

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chentao1204 at 2018-12-26 17:38:39
给你站内发消息了...

请问您找到解决办法了吗
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10楼2019-10-28 08:46:25
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普通回帖

chentao1204

木虫 (正式写手)
我也遇到这种现象，请问你找到原因了吗？
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2楼2018-12-26 14:31:34
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CRUSH123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chentao1204 at 2018-12-26 17:38:39
给你站内发消息了...

请问你们找到原因了吗？
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5楼2019-03-06 10:36:50
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CRUSH123

新虫 (小有名气)
楼主，请问您找到原因了么？
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6楼2019-03-06 10:39:42
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蜗牛上的女孩

铜虫 (小有名气)
请问。。。。知道怎么清洗更好了吗？跪求啊，最近被这个搞死了
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7楼2019-08-02 20:25:22
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匿名

本帖仅楼主可见
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8楼2019-09-29 09:08:56
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axxxx

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hujinling at 2018-12-26 15:06:43
我做好几次了都这样要不就是洗不干净要不就是啥都洗没了，咱两加微信交流找下原因吧
...

请问您找到解决办法了吗？
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9楼2019-10-28 08:45:01
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