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chenxiangyun

至尊木虫 (著名写手)

[交流] HPLC

一个杂质(含n-甲基甲胺丁二酸基团)定位时保留时间为21min,样品中在22min有个杂质光谱吸收和21min杂质一样,将21min已知杂质加标到该样品,22min杂质增大(20-22min没出现新杂质),且加标后22min峰纯度很纯,现在怀疑样品中22min杂质就是保留时间为21min的已知杂质……但是现在的问题是怎么才能让定位杂质和样品中的杂质重合,换了各种ph值的稀释液3.0到水-乙腈混合液,都是上述的结果………请教:这两个杂质是一个杂质吗?如果是,应该怎么调整使定位杂质和样品中杂质重合呢?流动相ph值不对?

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[ Last edited by chenxiangyun on 2018-12-25 at 16:20 ]
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chenxiangyun

至尊木虫 (著名写手)

有大神遇到这种状况吗?

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2楼2018-12-25 16:19:29
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zinfly

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
为什么不换个柱子,换个方法测定啊,出峰时间22min,是不是有点靠后。可以考虑其他柱子
或者直接LCMS
3楼2018-12-25 20:11:53
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chenxiangyun

至尊木虫 (著名写手)

柱子就是这个项目专用的,新买的,MS显示是一个峰,现在问题是定位和样品中该杂质不重合,觉得应该是流动相的问题吧

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4楼2018-12-25 21:35:00
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chenxiangyun

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zinfly at 2018-12-25 20:11:53
为什么不换个柱子,换个方法测定啊,出峰时间22min,是不是有点靠后。可以考虑其他柱子
或者直接LCMS



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5楼2018-12-25 21:35:44
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柳絮虫

新虫 (职业作家)


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引用回帖:
4楼: Originally posted by chenxiangyun at 2018-12-25 21:35:00
柱子就是这个项目专用的,新买的,MS显示是一个峰,现在问题是定位和样品中该杂质不重合,觉得应该是流动相的问题吧

做样品的溶剂,偶然也会有影响。看看供试液的pH值等等(仪器的稳定性)
6楼2018-12-26 13:57:59
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wu_huhui

新虫 (初入文坛)


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可以采用MS分析一下两者的分子量,然后你说的21分钟、22min杂质是不是在同一个体系下进行检测的呢?你说的单独定位是21min,加入供试品中又是22min这样吗?可以考虑一下这个已知杂质的性质,看供试品溶液体系对这个杂质的保留是否存在影响?同时还可以通过调整不同的梯度让两者变化位置,若不是同一杂质,变化趋势一般很容易出来
7楼2018-12-26 20:19:14
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木木爱吃虫

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我觉得在同一体系下出峰时间不一样,应该不是同一种物质,有没有可能是同分异构体

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8楼2018-12-26 21:43:43
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米色的夏

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我觉得跟多的应该是分子形态不同,如果基团里有多种酸碱基团的话,有可能是会和流动相里的缓冲盐形成一盐,二盐,这种时候在柱子上的保留时间可能会不一样出现裂峰啥的。我觉得你可以把ph往3.0以下调,以及改变样品溶剂的ph。多半还是你ph不合适
我无法放下的是那心中孤独而高贵的骄傲
9楼2018-12-27 14:18:33
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