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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 富血小板血浆制备
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brightangel

铁虫 (初入文坛)

[求助] 富血小板血浆制备

制备富血小板血浆时必须加抗凝剂吗？如果取血后不加抗凝剂直接离心的话，能分离出血小板血浆层吗？对操作温度有什么限制呢？麻烦大神赐教
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1楼 2018-12-20 21:20:06
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小猴2310

新虫 (小有名气)
就用蓝管采血 貌似是枸橼酸钠抗凝 然后低速离心就行了 离心后尽快把血浆分离出来

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2楼2018-12-20 23:19:18
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brightangel

铁虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 小猴2310 at 2018-12-20 23:19:18
就用蓝管采血 貌似是枸橼酸钠抗凝 然后低速离心就行了 离心后尽快把血浆分离出来

加入抗凝剂和后续激活血小板时都要加东西，会导致血小板计数不精确吧。请问不加抗凝剂可以吗？就是直接离心可以吗？
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3楼2018-12-23 16:26:16
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小猴2310

新虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by brightangel at 2018-12-23 16:26:16
加入抗凝剂和后续激活血小板时都要加东西，会导致血小板计数不精确吧。请问不加抗凝剂可以吗？就是直接离心可以吗？...

我没试过你说的这种方法哈 不过我猜 如果不加抗凝剂 一定要采血之后立刻离心分离吧 不然时间稍久也会激活血小板的

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4楼2018-12-23 18:15:32
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brightangel

铁虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by 小猴2310 at 2018-12-23 18:15:32
我没试过你说的这种方法哈 不过我猜 如果不加抗凝剂 一定要采血之后立刻离心分离吧 不然时间稍久也会激活血小板的
...

我想的也是要立刻就离心，请问这样的话整个操作需要在低温下进行吗？还是常温就可以呢？我觉得低温的话是不是可以降低凝血酶活性，是不是就不会那么快就凝血了啊？
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5楼2018-12-24 22:52:34
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小猴2310

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5楼: Originally posted by brightangel at 2018-12-24 22:52:34
我想的也是要立刻就离心，请问这样的话整个操作需要在低温下进行吗？还是常温就可以呢？我觉得低温的话是不是可以降低凝血酶活性，是不是就不会那么快就凝血了啊？...

不可以吧 低温会影响血小板活性的 正常血小板保存也是室温20℃左右 不可以低温的

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6楼2018-12-24 23:17:18
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brightangel

铁虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by 小猴2310 at 2018-12-24 23:17:18
不可以吧 低温会影响血小板活性的 正常血小板保存也是室温20℃左右 不可以低温的
...

我只是从凝血酶活性的角度考虑低温，的确没有考虑血小板活性。但是正常离心环节中离心操作都是在4摄氏度下进行的呀？不也是低温操作吗？
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7楼2018-12-25 09:23:23
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小猴2310

新虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by brightangel at 2018-12-25 09:23:23
我只是从凝血酶活性的角度考虑低温，的确没有考虑血小板活性。但是正常离心环节中离心操作都是在4摄氏度下进行的呀？不也是低温操作吗？...

啊 我接触到的富血小板血浆制备都是室温～没有四度啊

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8楼2018-12-25 09:44:36
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brightangel

铁虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by 小猴2310 at 2018-12-25 09:44:36
啊 我接触到的富血小板血浆制备都是室温～没有四度啊
...

哦哦 我查的文献中有提到要低温离心的，因为离心机内部会升温，要保证血液温度不升高，我自己分析会不会跟血小板的凝聚状态有关呢？
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9楼2018-12-25 10:25:14
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