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hcj000

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】正相色谱与反相色谱的区别

如题!谢谢各位大虾!

[ Last edited by 佳怡 on 2009-5-11 at 15:21 ]
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温馨9126

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
佳怡(金币+4,VIP+0):感谢回复~谢谢 5-11 15:20
本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强;反相色谱柱填料极性弱,洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明:
1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
2、反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
2楼2009-04-29 14:57:27
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hcj000

新虫 (小有名气)

谢谢啦! 我用的树脂是含有胺基团的硅胶柱,但是流动相是水和乙腈。是属于哪种色谱?正相的吗?
3楼2009-04-29 14:59:56
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weipingwu

金虫 (正式写手)


opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流,欢迎常来分析版 10-11 12:49
引用回帖:
Originally posted by hcj000 at 4/29/09  14:59:
谢谢啦! 我用的树脂是含有胺基团的硅胶柱,但是流动相是水和乙腈。是属于哪种色谱?正相的吗?

是反相色谱!正相的流动相一般为正己烷和异丙醇,非极性的流动相,不能含水的!
不经历风雨,怎能见彩虹?
4楼2009-04-29 15:35:59
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sunlucy

木虫 (小有名气)

长见识了,谢谢!
5楼2009-10-10 21:33:13
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fjcyt

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
opq691(金币+1,VIP+0):感谢参与交流,欢迎常来分析版 10-11 12:49
其实简单来说。正相与反相色谱的最大区别是流动相与固定相的极性大小差别,从而导致流出顺序的差别。
正相是流动相的极性小于固定相
反相是固定相的极性小于流动相
6楼2009-10-11 09:52:31
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