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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » 琼脂糖装柱问题
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清风明月～

新虫 (初入文坛)
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琼脂糖装柱问题
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1.先将凝胶用抽滤机抽干（买来时20%乙醇浸泡的），用大概凝胶：水=3：1的水溶胀2h，最后搅拌程糊状。
2.在固定好的层析柱中加入约1/3体积的缓冲液，关闭柱出口，在柱顶部连续加入已经充分平衡好的琼脂糖凝胶（事先把凝胶调成流动性较好的糊状物），待凝胶沉降约3cm时打开出口，并连续加入糊状的凝胶，使其在形成的胶粒床面上连续均匀的沉降，直至凝胶完全沉降至适当的柱床体积为止。然后关闭出口，使上层有3cm高的缓冲液并在整个层析过程中一直维持，不能使柱子走空。静置沉降一夜。
3.第二天用蠕动泵低流速（低于2ml/min，柱直径2.6cm）平衡柱子5h左右。然后湿法上样。
是这样做的吗？有什么步骤是错了的吗？

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1楼 2018-12-09 16:18:45
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刘雨努力

新虫 (著名写手)
★
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冷水溶胀2小时不够

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5楼2018-12-09 16:57:43
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清风明月～

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 刘雨努力 at 2018-12-09 16:57:43
冷水溶胀2小时不够

蒸馏水溶胀2小时还不够吗？那需要溶胀几小时?

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6楼2018-12-09 22:17:16
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hdchina20102楼
2018-12-09 16:18   回复  
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abc8765244083楼
2018-12-09 16:19   回复  
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tzynew4楼
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