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琼脂糖装柱问题
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清风明月~
新虫
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琼脂糖装柱问题
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1.先将凝胶用抽滤机抽干(买来时20%乙醇浸泡的),用大概凝胶:水=3:1的水溶胀2h,最后搅拌程糊状。
2.在固定好的层析柱中加入约1/3体积的缓冲液,关闭柱出口,在柱顶部连续加入已经充分平衡好的琼脂糖凝胶(事先把凝胶调成流动性较好的糊状物),待凝胶沉降约3cm时打开出口,并连续加入糊状的凝胶,使其在形成的胶粒床面上连续均匀的沉降,直至凝胶完全沉降至适当的柱床体积为止。然后关闭出口,使上层有3cm高的缓冲液并在整个层析过程中一直维持,不能使柱子走空。静置沉降一夜。
3.第二天用蠕动泵低流速(低于2ml/min,柱直径2.6cm)平衡柱子5h左右。然后湿法上样。
是这样做的吗?有什么步骤是错了的吗?
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刘雨努力
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冷水溶胀2小时不够
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5楼
2018-12-09 16:57:43
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清风明月~
新虫
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5楼
:
Originally posted by
刘雨努力
at 2018-12-09 16:57:43
冷水溶胀2小时不够
蒸馏水溶胀2小时还不够吗?那需要溶胀几小时?
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6楼
2018-12-09 22:17:16
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hdchina2010
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2018-12-09 16:18
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abc876524408
3楼
2018-12-09 16:19
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tzynew
4楼
2018-12-09 16:21
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